Оценка in vitro влияния аллогенной костной матрицы на характеристики мезенхимальных стромальных клеток из жировой ткани при создании комбинированных тканеинженерных конструкций

Обложка


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Цель исследования — оценка in vitro влияния нативной и депротеинизированной компактной и губчатой аллогенных костных матриц на характеристики мезенхимальных стромальных клеток из жировой ткани (МСК ЖТ) для создания эффективной комбинированной тканеинженерной конструкции.

Материал и методы. Исследовали 24 образца нативной и депротеинизированной компактной и губчатой костной ткани, которые подвергали механической обработке, моделированию с последующей стерилизацией образцов ионизирующим излучением и бактериологическим контролем стерилизации. Часть образцов проходила процедуру депротеинизации. В качестве тестовых культур для оценки взаимодействия с исследуемыми образцами костной ткани использовали охарактеризованные культуры МСК ЖТ человека. Для характеристики выраженности адгезии, миграции и жизнеспособности МСК на образцах костного матрикса использовали флуоресцентный имиджер Cytation-5 и флуорохромы Hoechst 3334 (BD Pharmingen™) и кальцеин (Calcein AM, BD Pharmingen™). Цитотоксичность матриц оценивали с помощью МТТ-теста после 1 и 7 сут. экстракции.

Результаты. Образцы исследуемых костных матриц характеризуются отсутствием цитотоксичности (ранг 1). Это сопровождается хорошей адгезией и миграцией МСК ЖТ на любой поверхности костного матрикса и сохранением жизнеспособности клеток в течение 7 сут. наблюдения. В большей степени изменения касаются увеличения размеров ядер клеток, адгезированных на депротеинизированной костной матрице губчатой структуры, на 25–30% по сравнению с величиной аналогичного параметра на других образцах. При этом размеры клеток на депротеинизированной костной матрице несколько больше (величина ядер клеток с 8,8 до 11,5 мкм, средняя площадь ядер клеток от 86,3 мкм до 129,0 мкм, средний периметр ядер клеток с 30,7 мкм до 40,7 мкм), чем на образцах нативной костной матрицы.

Заключение. Результаты исследования различных аллогенных костных матриц демонстрируют, что глубокая степень очистки костной матрицы определяет отсутствие цитотоксичности и наиболее благоприятные условия для адгезии, миграции, пролиферации и жизнеспособности МСК ЖТ. Это обусловливает возможность создания тканеинженерных конструкций на основе матриц из костной ткани различной структуры. Наилучшим образом для этой цели подходят депротеинизированные губчатые костные матрицы.

Об авторах

Л. А. Черданцева

ФГБУ «Новосибирский научно-исследовательский институт травматологии и ортопедии им. Я.Л. Цивьяна» Минздрава России

Email: cherdanceff@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-4729-3694

Черданцева Лилия Александровна — канд. мед. наук, заведующий лабораторией заготовки и консервации тканей

г. Новосибирск

Россия

Е. А. Анастасиева

ФГБУ «Новосибирский научно-исследовательский институт травматологии и ортопедии им. Я.Л. Цивьяна» Минздрава России

Email: evgeniya.anastasieva@gmail.com
ORCID iD: 0000-0002-9329-8373

Анастасиева Евгения Андреевна — аспирант

г. Новосибирск

Россия

Д. Я. Алейник

ФГБОУ ВО «Приволжский исследовательский медицинский университет» Минздрава России

Email: daleynik@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0003-1482-4281

Алейник Диана Яковлевна — канд. мед. наук, старший научный сотрудник лаборатории регенеративной медицины НИИ ЭОиБМТ (НИИ экспериментальной онкологии и биомедицинских технологий)

г. Нижний Новгород

М. Н. Егорихина

ФГБОУ ВО «Приволжский исследовательский медицинский университет» Минздрава России

Email: egorihina.marfa@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-8815-9651

Егорихина Марфа Николаевна — канд. биол. наук, ведущий научный сотрудник лаборатории регенеративной медицины НИИ ЭОиБМТ (НИИ экспериментальной онкологии и биомедицинских технологий)

г. Нижний Новгород

И. А. Кирилова

ФГБУ «Новосибирский научно-исследовательский институт травматологии и ортопедии им. Я.Л. Цивьяна» Минздрава России

Автор, ответственный за переписку.
Email: IrinaKirilova71@mail.ru
ORCID iD: 0000-0003-1911-9741

Кирилова Ирина Анатольевна — д-р мед. наук, заместитель директора по научной работе

г. Новосибирск

Список литературы

  1. Воробьев К.А., Божкова С.А., Анисимова Л.И., Нетылько Г.И. Влияние методов заготовки костно-пластического материала на процессы ремоделирования в модели костного дефекта в эксперименте in vivo. Практическая медицина. 2019;17(1):67-72. doi: 10.32000/2072-1757-2019-1-67-72.
  2. Живцов О.П., Алейник Д.Я., Орлинская Н.Ю., Митрофанов В.Н. Особенности регенерации костной ткани в условиях применения клеточно-инженерной конструкции для восстановления костного дефекта у кроликов. Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. 2019;(11):54-59. doi: 10.17513/mjpfi.12931.
  3. Кирилова И.А., Садовой М.А., Подорожная В.Т. Сравнительная характеристика материалов для костной пластики: состав и свойства. Хирургия позвоночника. 2012;(3):72-83. doi: 10.14531/ss2012.3.72-83
  4. Мухаметов У.Ф., Мухаметов Ф.Ф., Сулейманов Я.Н., Нагаев Р.Я., Нигматуллин Р.Т., Шангина О.Р. Некоторые аспекты ревизионного эндопротезирования тазобедренного сустава. Пластика костных дефектов губчатыми аллоплантами. Гений ортопедии. 2016;(4):29-35. doi: 10.18019/1028-4427-2016-4-29-35.
  5. Fernandez de Grado G., Keller L., Idoux-Gillet Y., Wagner Q., Musset A.M., Benkirane-Jessel N. et al. Bone substitutes: a review of their characteristics, clinical use, and perspectives for large bone defects management. J Tissue Eng. 2018;9:2041731418776819. doi: 10.1177/2041731418776819.
  6. Воробьев К.А., Божкова С.А., Тихилов Р.М., Черный А.Ж. Современные способы обработки и стерилизации аллогенных костных тканей (обзор литературы). Травматология и ортопедия России. 2017;23(3): 134-147. doi: 10.21823/2311-2905-2017-23-3-134-147.
  7. Кирилова И.А. Анатомо-функциональные свойства кости как основа создания костно-пластических материалов для травматологии и ортопедии. Москва: Физматлит; 2019. 256 с.
  8. Gharedaghi M., Peivandi M.T., Mazloomi M., Shoorin H.R., Hasani M., Seyf P., Khazaee F. Evaluation of Clinical Results and Complications of Structural Allograft Reconstruction after Bone Tumor Surgery. Arch Bone Jt Surg. 2016;4(3):236-242.
  9. Qu H., Guo W., Yang R., Li D., Tang S., Yang Y. at al. Reconstruction of segmental bone defect of long bones after tumor resection by devitalized tumorbearing bone. World J Surg Oncol. 2015;13:282. doi: 10.1186/s12957-015-0694-3.
  10. Avril P., Le Nail L.R., Brennan M.Á., Rosset P., De Pinieux G., Layrolle P. et al. Mesenchymal stem cells increase proliferation but do not change quiescent state of osteosarcoma cells: Potential implications according to the tumor resection status. J Bone Oncol. 2015;5(1): 5-14. doi: 10.1016/j.jbo.2015.11.002.
  11. Perrot P., Rousseau J., Bouffaut A.L., Rédini F., Cassagnau E., Deschaseaux F. et al. Safety concern between autologous fat graft, mesenchymal stem cell and osteosarcoma recurrence. PLoS One. 2010;5(6):e10999. doi: 10.1371/journal.pone.0010999.
  12. Caplan A.I., Hariri R. Body Management: Mesenchymal Stem Cell the Internal Regenerator. Stem Cells Transl Med. 2015;4(7):695-700. doi: 10.5966/sctm.2014-0291.
  13. Кирилова И.А., Подорожная В.Т., Павлов В.В., Бедорева И.Ю. Организация донорства головок бедренных костей в Новосибирском НИИТО. Успехи современного естествознания. 2015;(9):49-52. Режим доступа: https://natural-sciences.ru/ru/article/view?id=35524.
  14. Хэм А., Кормак Д. Костная ткань. В кн.: Гистология. Москва: Мир; 1983. Т. 3. С. 19-131.
  15. Mossman T. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assays. J Immunol Met. 1983;65:55-63.
  16. Shanmugam S., Gopal B. Antimicrobial and cytotoxicity evaluation of aliovalent substituted hydroxyapatite. App Surf Sci. 2014;303:277-281. doi: 10.1016/j.apsusc.2014.02.166.
  17. Ho-Shui-Ling A., Bolander J., Rustom L.E., Johnson A.W., Luyten F.P., Picart C. Bone regeneration strategies: Engineered scaffolds, bioactive molecules and stem cells current stage and future perspectives. Biomaterials. 2018;180:143-162. doi: 10.1016/j.biomaterials.2018.07.017.
  18. Oryan A., Alidadi S., Moshiri A., Maffulli N. Bone regenerative medicine: classic options, novel strategies, and future directions. J Orthop Surg Res. 2014;9(1):18. doi: 10.1186/1749-799X-9-18.
  19. Amini A.R., Laurencin C.T., Nukavarapu S.P. Bone tissue engineering: recent advances and challenges. Crit Rev Biomed Eng. 2012;40:363-408. doi: 10.1615/CritRevBiomedEng.v40.i5.10.
  20. Mallick K.K., Cox S.C. Biomaterial scaffolds for tissue engineering. Front Biosci. 2013;5:341-360. doi: 10.2741/e620.
  21. Bose S., Roy M., Bandyopadhyay A. Recent advances in bone tissue engineering scaffolds. Trends Biotechnol. 2012;30(10):546-554. doi: 10.1016/j.tibtech.2012.07.005.
  22. Dawson E., Mapili G., Ericson K., Taqvi S., Roy K. Biomaterials for stem cell differentiation. Adv Drug Deliv Rev. 2008;60:215-228. doi: 10.1016/j.addr.2007.08.037.
  23. Reichert J.C., Nöth U., Berner A., Hutmacher D.W. Bone. In: Steinhoff G. (ed.) Regenerative Medicine – from Protocol to Patient. Switzerland: Springer, Cham; 2016. doi: 10.1007/978-3-319-28386-9_9.
  24. Mushahary D., Spittler A., Kasper C., Weber V., Charwat V. Isolation, cultivation, and characterization of human mesenchymal stem cells. Cytometry A. 2018;93(1):19-31. doi: 10.1002/cyto.a.23242
  25. Dominici M., Le Blanc K., Mueller I., Slaper- Cortenbach I., Marini F., Krause D. at al. Minimal criteria for defining multipotent mesenchymal cells. The international Society for cellular Therapy position stratement. Cytotherapy. 2006; 8(4):315-317. doi: 10.1080/14653240600855905.
  26. Ugarte D.A., Morizono K., Elabarbary A., Alfonso Z., Zuk P.A., Zhu M. at al. Comparison of multilineage cells from human adipose tissue and bone marrow. Cells Tissues Organs. 2003;174:101-109. doi: 10.1159/000071150.
  27. Mizuno H., Tobita M., Uysal A.C. Concise review: Adipose-derived stem cells as a novel tool for future regenerative medicine. Stem Cells. 2012;30(5):804-810. doi: 10.1002/stem.1076.
  28. Im G.I., Shin Y.W., Lee K.B. Do adipose tissue-derived mesenchymal stem cells have the same osteogenic and chondrogenic potential as bone marrow-derived cells? Osteoarthritis Cartilage. 2005;13(10):845-853. doi: 10.1016/j.joca.2005.05.005.
  29. Hayashi O., Katsube Y., Hirose M., Ohgushi H., Ito H. Comparison of osteogenic ability of rat mesenchymal stem cells from bone marrow, periosteum, and adipose tissue. Calcif Tissue Int. 2008;82(3):238-247. doi: 10.1007/s00223-008-9112-y.
  30. Kern S., Eichler H., Stoeve J., Klüter H., Bieback K. Comparative analysis of mesenchymal stem cells from bone marrow, umbilical cord blood, or adipose tissue. Stem Cells. 2006;24(5):1294-1301. doi: 10.1634/stemcells.2005-0342.
  31. Lendeckel S., Jodicke A., Christophis P., Heidinger K., Wolff J., Fraser J.K. et al. Autologous stem cells (adipose) and fibrin glue used to treat widespread traumatic calvarial defects: case report. J Craniomaxillofac Surg. 2004;32(6):370-373. doi: 10.1016/j.jcms.2004.06.002.
  32. Mesimäki K., Lindroos B., Törnwall J., Mauno J., Lindqvist C., Kontio R. et al. Novel maxillary reconstruction with ectopic bone formation by GMP adipose stem cells. Int J Oral Maxillofac Surg. 2009;38(3):201-209. doi: 10.1016/j.ijom.2009.01.001.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© ,


СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: серия ПИ № ФС 77 - 82474 от 10.12.2021.


Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах