Обнаружение грибов в ладонном апоневрозе при контрактуре Дюпюитрена методом сканирующей электронной микроскопии

Обложка


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Цель исследования — определить возможности световой и сканирующей электронной микроскопии (СЭМ) в обнаружении грибов в операционном материале от пациентов с контрактурой Дюпюитрена. Материал и методы. Исследовали фрагменты ладонного апоневроза от 27 пациентов с контрактурой Дюпюитрена. Для исследования в СЭМ JSM-840 (Jeol, Япония) образцы после фиксации обезвоживали, пропитывали в камфене, высушивали, напыляли серебром в ионном напылителе IB-6 (Eiko, Япония). Парафиновые срезы, окрашенные гематоксилином и эозином и метенамин-серебром P.A.S.M. оцифровывали с помощью микроскопа AxioScope.A1 (Carl Zeiss Micro Imaging GmbH, Германия). Результаты. При окрашивании парафиновых срезов метенамин-серебром P.A.S.M. признаки микотической микрофлоры выявлены только у двух (7,4%) из 27 пациентов, а с применением метода СЭМ — у 16 пациентов (59%). Морфологические фенотипы и ультраструктура межклеточных контактов дрожжеподобных грибов сходны с Candida albicans. Во всех случаях обнаружены почкующиеся клетки. Деструкция соединительной ткани ладонного апоневроза проявлялась в виде разрыхления, расслоения и формирования полостей — зон лизиса. Заключение. Метод СЭМ позволил оценить ультраструктуру клеток грибов и их взаимодействие с окружающими тканями в операционном материале от пациентов с контрактурой Дюпюитрена. Более высокий процент выявления грибковой инвазии по сравнению с методом P.A.S.M. связан с более высокой разрешающей способностью и возможностью анализа большей площади тканевых образцов.

Об авторах

Т. А. Ступина

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр травматологии и ортопедии им. акад. Г.А. Илизарова» Минздрава России

Автор, ответственный за переписку.
Email: StupinaSTA@mail.ru

Ступина Татьяна Анатольевна — д-р биол. наук, ведущий научный сотрудник лаборатории морфологии

г. Курган

Россия

Н. С. Мигалкин

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр травматологии и ортопедии им. акад. Г.А. Илизарова» Минздрава России

Email: fake@neicon.ru

Мигалкин Николай Сергеевич — научный сотрудник лаборатории морфологии

г. Курган

Россия

Н. А. Щудло

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр травматологии и ортопедии им. акад. Г.А. Илизарова» Минздрава России

Email: fake@neicon.ru

Щудло Наталья Анатольевна — д-р мед. наук, заведующая лабораторией клиники реконструктивно-пластической хирургии и хирургии кисти

г. Курган

Россия

М. М. Щудло

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр травматологии и ортопедии им. акад. Г.А. Илизарова» Минздрава России

Email: fake@neicon.ru

Щудло Михаил Моисеевич — д-р мед. наук, ведущий научный сотрудник лаборатории клиники реконструктивно-пластической хирургии и хирургии кисти

г. Курган

Россия

Список литературы

  1. Ng M., Thakkar D., Southam L., Werker P., Ophoff R., Becker K., Nothnagel M. et al. A Genome-wide Association Study of Dupuytren Disease Reveals 17 Additional Variants Implicated in Fibrosis. Am J Hum Genet. 2017;101(3):417-427. doi: 10.1016/j.ajhg.2017.08.006.
  2. Unglaub F., Loos B., Schwarz S., Kneser U., Dragu A., Horch R.E. Phlegmonous-infection in first degree Dupuytren’s disease. Arch Orthop Trauma Surg. 2009;129(4):445-448. doi: 10.1007/s00402-008-0589-7.
  3. Dumitrescu-Ionescu D. A New Therapeutic Approach to Dupuytren’s Contracture / Disease (DD). Adv Plast Reconstr Surg. 2017;1(5):129-136.
  4. Guarner J., Brandt M.E. Histopathologic diagnosis of fungal infections in the 21st century. Clin Microbiol Rev. 2011;24(2):247-280. doi: 10.1128/CMR.00053-10.
  5. Ensikat H.-J., Weigend M. Creating internal conductivity in dry biological SEM samples by a simple vapour treatment. J Microsc. 2014;256(3):226-230. doi: 10.1111/jmi.12177.
  6. Sugimoto S., Okuda K., Miyakawa R., Sato M., AritaMorioka K., Chiba A. et al. Imaging of bacterial multicellular behaviour in biofilms in liquid by atmospheric scanning electron microscopy. Sci Rep. 2016;6:25889. Available from: https://www.nature.com/articles/srep25889. doi: 10.1038/srep25889.
  7. Chebotar I.V., Novikov I.A., Subbot A.M., Mayansky N.A. Lanthanoid staining as a fast technology of preparing microbiological specimens for scanning electron microscopy. CTM. 2017;9(3):23-29. doi: 10.17691/stm2017.9.3.03.
  8. Raab N., Bachelet I. Resolving biofilm topography by native scanning electron microscopy. J Biol Methods. 2017;4(2):e70. doi: 10.14440/jbm.2017.173.
  9. Yue X., Wang A., Li Q. The Role of Scanning Electron Microscopy in the Direct Diagnosis of Onychomycosis. Scanning. 2018:1581495. doi: 10.1155/2018/1581495.
  10. Yuping R., Kaiwen Z., Wenying H., Jinghong H., Xiaowei F., Shuang C. et al. Observation of Fungi, Bacteria, and Parasites in Clinical Skin Samples Using Scanning Electron Microscopy. In: Modern Electron Microscopy in Physical and Life Sciences. 2016. Available from: https://www.intechopen.com/books/modernelectron-microscopy-in-physical-and-life-sciences/observation-of-fungi-bacteria-and-parasites-inclinical-skin-samples-using-scanning-electronmicrosc. doi: 10.5772/61850.
  11. Legge J.W., Finlay J.B., McFarlane R.M. A study of Dupuytren’s tissue with the scanning electron microscope. J Hand Surg Am. 1981;6(5):482-492. doi: 10.1016/s0363-5023(81)80109-8.
  12. Józsa L., Salamon A., Réffy A., Renner A., Demel S., Donhöffer A., Pintér T., Thöring J. Fine structural alterations of the palmar aponeurosis in Dupuytren’s contracture. A combined scanning and transmission electronmicroscopic examination. Zentralbl Allg Pathol. 1988;134(1):15-25.
  13. Щудло Н.А., Ступина Т.А., Щудло М.М. Сканирующая электронная микроскопия ладонного апоневроза при контрактуре Дюпюитрена продвинутой стадии. Травматология и ортопедия России. 2019;(25)2: 150-156. doi: 10.21823/2311-2905-2019-25-2-150-156.
  14. Tubiana R. Dupuytren’s disease of the radial side of the hand. Hand Clin. 1999;15(1):149-159.
  15. Scherer W.P., Scherer M.D. Scanning electron microscope imaging of onychomycosis. J Am Podiatr Med Assoc. 2004;94(4):356-362. doi: 10.7547/0940356.
  16. Kubota T. Chronic and recurrent vulvovaginal candidiasis. Anippon Isbink Gakkai Zassibi. 1998;(39)4: 213-218. doi: 10.3314/jjmm.39.213.
  17. Хмельницкий О.К., Быков В.Л., Хмельницкая Н.М. Патоморфологическая диагностика микозов, вызываемых условно-патогенными грибами. Режим доступа: http://www.rusmedserv.com/mycology/html/labora15.htm
  18. Staniszewska M., Bondaryk M., Swoboda-Kopec E., Siennicka K., Sygitowicz G., Kurzatkowski W. Candida albicans morphologies revealed by scanning electron microscopy analysis. Braz J Microbiol. 2013;44(3):813-821. doi: 10.1590/S1517-83822013005000056.
  19. Wade R., Igali L., Figus A. Skin involvement in Dupuytren’s disease. J Hand Surg Eur. 2016;41(6):600-608. doi: 10.1177/1753193415601353.
  20. Щудло Н.А., Костин В.В. Патогенез н ропатии при контрактуре Дюпюитрена. Гений ортопедии. 2019;25(1):58-64. doi: 10.18019/1028-4427-2019-25-1-58-64.
  21. Долганова Т.И., Щудло Н.А., Шабалин Д.А., Костин В.В. Оценка гемодинамики артерий кисти и микроциркуляции кожи при контрактуре Дюпюитрена 3-4 стадий до и после оперативного лечения с применением чрескостной фиксации по Г.А. Илизарову. Гений ортопедии. 2019;25(1):86-92. doi: 10.18019/1028-4427-2019-25-1-86-92.
  22. Rehman S., Goodacre R., Day P.J., Bayat A., Westerhoff H.V. Dupuytren’s: a systems biology disease. Arthritis Res Ther. 2011;13(5):238. doi: 10.1186/ar3438.
  23. Badiee P., Hashemizadeh Z. Opportunistic invasive fungal infections: diagnosis & clinical management. Indian J Med Res. 2014;139(2):195-204.
  24. Gudmundsson K.G., Arngrímsson R., Sigfússon N., Jónsson T. Increased total mortality and cancer mortality in men with Dupuytren’s disease: a 15-year follow-up study. J Clin Epidemiol. 2002;55(1):5-10. doi: 10.1016/s0895-4356(01)00413-9.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© ,


СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: серия ПИ № ФС 77 - 82474 от 10.12.2021.


Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах